Analisi del C-terminale di Xotx2 e Xotx5 nello sviluppo di X. laevis

I geni Otx dei Vertebrati svolgono un ruolo di primaria importanza nella specificazione della regione rostrale del sistema nervoso centrale (SNC) dei Vertebrati. A sottolineare l’importanza di tali geni vi è il fatto che topi knock-out per Otx2 muoiono precocemente nell’embriogenesi per la totale assenza di tali strutture e per malformazioni generalizzate del piano corporeo (dovuti a movimenti anomali durante la gastrulazione). Scopo del presente lavoro è stato quello di analizzare l’importanza delle varie porzioni del C-terminale nell’azione di transattivazione di questi fattori di trascrizione. A questo scopo, si è provveduto alla creazione di vari costrutti Xotx2 e Xotx5, deleti al C-terminale, tramite PCR. Successivamente, il loro mRNA è stato trascritto “in vitro” e microiniettato in embrioni di Xenopus allo stadio di 4 blastomeri. Gli embrioni sono stati poi caratterizzati in base al fenotipo osservato e sottoposti ad analisi con opportuni markers molecolari allo scopo di evidenziare strutture ectopiche indotte in seguito all’iniezione. L’intento è di identificare quali domini funzionali di Xotx2 e Xotx5 siano essenziali per la loro diversa funzione.